PCRプライマー Tm・GC含量計算

最近接塩基対法でTmを求め、GC含量・アニーリング温度・相補鎖・GCクランプを評価します。

A・T・G・Cのみで入力します。空白は無視されます。

PCR反応液中の最終濃度です。通常0.1〜1.0μMです。

標準的なPCRバッファーで50mMです。

PCRプライマー Tm・GC含量計算の使い方・活用シーン

使い方

PCRプライマー Tm・GC含量計算は、最近接塩基対法でTmを求め、GC含量・アニーリング温度・相補鎖・GCクランプを評価します。画面に表示されている入力欄に必要な項目を入力し、ボタンを押すだけで結果がその場に表示されます。入力からボタン操作、結果の確認までは数秒で完結し、専門的な予備知識がなくても迷わず使えるように作られています。入力した内容がToolHubのサーバーに送信されることはなく、計算処理はすべてお使いのブラウザ内だけで完結するため、氏名や個人的な数値など、他人に見られたくない情報を扱う場面でも安心してご利用いただけます。結果に納得できない場合は、入力内容を書き換えるだけで即座に再計算されるので、条件を変えながら何度でも試すことができます。

どんなときに使うか

化学計算」に関する作業のうち、とくにPCR・プライマー設計・Tm・融解温度に関わる場面で役立ちます。手元に電卓や表計算ソフトがないとき、あるいは毎回同じ計算式を手で入力するのが面倒なときに、このページを開くだけで済ませられるのが最大の利点です。スマートフォンからでも同じ操作でそのまま使えるため、外出先や授業・会議の合間などパソコンを開けない状況でも、必要な数値をすぐに確認できます。ブックマークしておけば、次回以降はワンクリックでこのツールに戻ってこられます。

計算の仕組み・メリット

Tmの計算方法はどれを使うべきですか?
最近接塩基対法が最も正確です。隣り合う塩基の相互作用まで考慮するため、単純なWallace法やGC%法より実測値によく一致します。
アニーリング温度はどう決めますか?
一般にTmより5℃低い温度から始めます。非特異的増幅がある場合は温度を上げ、増幅量が不足する場合は下げて最適化します。

このように、計算の根拠となる考え方をあらかじめ明確にしたうえでロジックを実装しているため、表示された結果がどのような前提で導かれたのかを確認しながら安心して利用できます。また、ToolHubのツールはすべて登録不要・完全無料で、広告の表示以外の目的で個人情報を収集することはありません。気になるツールが他にもあれば、ページ上部のカテゴリーメニューや検索欄からすぐに探せます。